服務介紹 Service Introduction
擴增子測序主要通過對特定長度的 PCR 產物進行測序分析,細菌的16S rRNA基因和真菌的ITS基因結構既具有保守性,又具有高變性。通過測序結果與數據庫比較,可以分析環境細菌/真菌的菌群結構和多樣性。針對環境樣本,16S/18S/ITS 等基因擴增子測序是研究環境微生物多樣 性及群落組成差異的重要技術手段之一。
提供的服務 Services
根據不同的研究目的和需求,我們提供 3 種擴增子產品:16S rDNA 測序、ITS 測序及目標區域擴增子測序。具體介紹如下:
1、16S rDNA 測序:16S rDNA 為編碼原核生物核糖體小亞基 rRNA 的 DNA 序列, 具有 10 個保守區域和 9 個高變區域(V1-V9),其中保守區在細菌間差異不大,高變區具有屬或種的特異性,對 16S rDNA 某個高變區進行測序,用于研究環境微生物中細菌或古菌的群 落結構多樣性。
2、ITS 測序:ITS 分為兩個區域:ITS1 和 ITS2,ITS1 位于真核生物 rDNA 序列 18S 和 5.8S 之間,ITS2 位于真核生物 rDNA 序列 5.8S 和 28S 之間。對 ITS1或 ITS2 進行測序,用于研究環境微生物中真菌群落結構多樣性。
3、目標區域擴增子測序:根據客戶的研究需求,利用第二代高通量測序技術,對某些目標基因的 PCR 產物提供測序及分析服務。
實驗流程
分析內容
樣品要求 Sample Requirements
送樣建議 | 送樣量 | 重復樣品數 | DNA總量 | DNA濃度 | DNA純度A260/A280 | DNA完整性 | PCR 產物 | |
腸道樣品 | 糞便 | ≥1g,至少大于500mg | 10-20個 | m≥0.25μg | c>5ng/μl | 1.8~2.0 | DNA無降解,即電泳有明顯的主條帶 | 濃度 ≥ 20 ng/μl,總量 ≥ 400 ng,片段大小< 450 bp,條帶單一,無降解,無引物二聚體。 |
環境樣品 | 水體 | 50ml,推薦使用濾膜推注,2片以上 | 3-5個 | |||||
土壤樣品 | 土壤、淤泥 | ≥50g | 10個 | |||||
