三代測序綜合服務

服務介紹 Service Introduction

第三代測序技術（TGS）又稱單分子測序，通過光學、納米等技術直接解析單個DNA分子的堿基信號差異，實現序列讀取。主流平臺包括Pacific Biosciences的SMRT（熒光信號測序）和Oxford Nanopore的納米孔測序（電流信號測序），其核心優勢在于無需擴增的單分子直接測序。該技術憑借超長讀長（可達數萬堿基），廣泛應用于復雜基因組組裝、全長轉錄組分析及微生物群體研究等領域，可突破重復序列和雜合區域的組裝瓶頸。在臨床檢測中，其高精度結構變異檢測能力（如缺失、倒位）、對短串聯重復（STR）和甲基化特征的識別優勢，使其在腫瘤基因組學和罕見病診斷中具有顯著價值。

服務優勢 Service Advantages

單分子測序：無需PCR擴增，直接對單條DNA/RNA分子測序，避免擴增偏差，保留原始堿基修飾信息）。

超長讀長：單次測序可達數千至數萬堿基，顯著提升復雜基因組拼接效率，解決重復序列和雜合區域組裝難題。

高精度與實時性：測序精度高達99.9999%，部分技術可實時輸出數據（如納米孔測序），滿足動態監測需求。

多應用場景覆蓋：適用于全長轉錄組分析、結構變異檢測（如缺失、倒位）、微生物快速鑒定及表觀遺傳研究。

直接測序能力：可直接讀取RNA序列，無需反轉錄，減少中間環節誤差，提升實驗效率與準確性。

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測序合格樣品要求

測序合格樣品要求

一、菌液及平板

1.1體積≥200uL的新鮮菌液；也可提供≥5ml菌液或沉淀菌體直接提取質粒。送樣前請做好樣品封存，防止漏液。

1.2培養好的平板或劃線平板

*特殊菌液標注培養條件；古菌需自行培養后送樣；噬菌體樣本不接收，感謝理解。

二、質粒及PCR產物

2.1樣品濃度：電泳有明顯條帶，且濃度（Qubit定量）≥10 ng/uL;

2.2樣品純度（Nanodrop檢測）: OD260/280在1.8-2.0，OD260/230在2.0-2.2;溶液中不含去污劑、表面活性劑、變性劑，螯合劑和高濃度的鹽，蛋白質

2.3樣品需求量:體積≥20 uL，總量約200ng，50kb以上大質粒需要總量≥500ng;

2.4樣品溶于超純水中（雙蒸水、Milli-Q等），不要使用TE溶解，會影響后續反應。

細菌完成圖合格樣本要求

一、樣本類型：

（1）菌沉淀：細菌、放線菌（致病菌除外）。致病菌目錄請參考《人間傳染的病原微生物目錄（2023版）》表2。危險等級分類為二級的病原不接受。危險等級分類為三級的病原，請滅活后送檢。

（2）基因組DNA：細菌、放線菌中提取的基因組。支原體、衣原體、立克次體、螺旋體咨詢。

二、樣本要求：

（1）菌沉淀：液體培養至對數期,0D600約0.6-0.8,收集菌體 3-5ml，1.5ml離心管低溫4度離心，棄上清，保留管底菌體，液冷凍。建議同時送 1-2管重復。

（2）基因組DNA：DNA 樣品澄清透明，總量≥ 3μg；DNA 純度OD260/280在1.8-2.0之間，OD260/OD230 在2.0-2.2之間；DNA 濃度≥50 ng/μL；DNA完整無降解，無RNA、蛋白質等污染，DNA 片段平均長度

菌種鑒定合格樣本要求

一、純菌：接受平板單克隆、菌液、菌沉淀，真菌菌絲。不接受可能的致病菌。

二、混合菌：接收未分離培養的污染菌等。將污染菌部分轉移至 1.5 mL EP 管中。

AAV測序合格樣本要求

總量至少為1.0×10^12完整病毒拷貝，溶解在200μL PBS中（樣本濃度5.0×10^9 GC/μL）。